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DNA鑒定-多重單堿基延伸SNP分型技術
http://www.jfuj.com.cn/      2013-07-26 10:49       來源:上海親子鑒定中心法醫物證司法鑒定所
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多重單堿基延伸SNP分型技術(multiplex SNaPshot)由美國應用生物公司開發,主要針對中等通量的SNP分型項目。在一個含有測序酶、4種熒光標記的ddNTP、緊挨多態位點5 7端的不同長度延伸引物和PCR產物模板的反應體系中,引物延伸一個堿基即終止,經AB測序儀跑膠后,根據峰的顏色可知摻人的堿基種類,從而確定該樣本的基因型,根據峰移動的膠位置確定該延伸產物對應的SNP位點。對于PCR產物模板可通過多重PCR反應體系來獲得。與其他SNP分型技術(RFLP、Taqman、SNPstream)相比,多重單堿基延伸SNP分型技術具有如下優勢。①分型準確,其準確度僅亞于直接測序。②多位點同時檢測,可以同時檢測達12個位點,而RFLP及Taqman -次僅能檢測一個。③不受SNP位點多態特性限制,不管該位點是G/C、AlT、G/A、C/T還是插入/缺失多態,都可以放在一個體系中檢測。④不受樣本量的限制。⑤可以檢測出受污染的樣本,如果一個樣本的分趔峰譜偏離正常的分布,它可以提示該樣本可能受到污染或濃度過低,而其他分型方法則不能做到這一點。

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